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警惕新冠核酸提取時的胍鹽(鹽酸胍、異硫氰酸胍)殘留​!

就目前的數據來看,疑似病例的病毒核酸檢測假陰性頗高。其中原因除瞭病人病程、采集方式、樣品送檢方式(pooling)等,還有很重要的一部分來自核酸檢測試劑盒本身。  盡管做好

就目前的數據來看,疑似病例的病毒核酸檢測假陰性頗高。其中原因除瞭病人病程、采集方式、樣品送檢方式(pooling)等,還有很重要的一部分來自核酸檢測試劑盒本身。

  盡管做好瞭防疫常態化的準備,疫情反彈及嚴峻形勢還是讓人始料未及。新冠病毒檢測及結果又一次成為社會關註的焦點。

  新冠病毒檢測有多種方法,包括核酸檢測、抗體檢測、電鏡、免疫組化等。國傢衛生健康委辦公廳公佈瞭針對新冠病毒的最新實驗室檢測指南,主要還是采用經典、成熟的實時熒光定量qPCR來進行鑒定。

  然而,就目前的數據來看,疑似病例的病毒核酸檢測假陰性頗高。其中原因除瞭病人病程、采集方式、樣品送檢方式(pooling)等,還有很重要的一部分來自核酸檢測試劑盒本身。據瞭解,多個CDC批準的新冠樣本核酸提取試劑盒都含有異硫氰酸胍(GuSCN)和鹽酸胍等組分。如果異硫氰酸胍殘留在樣本中,不會明顯改變核酸樣本在260nm處的吸光值以及核酸測量濃度,因此使用分光光度計可能檢不出胍鹽殘留。但是,殘留的異硫氰酸胍(GuSCN)可引起聚合酶變性,從而抑制qPCR反應,最終可能影響檢測結果。

   異硫氰酸胍(GuSCN) 不會明顯改變核酸樣本在260nm處的吸光值

  增加異硫氰酸胍(GuSCN)濃度會提高Ct值

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