氨基柱分類為正相固定相，卻可在正相、反相、離子交換或 HILIC 模式下使用，所以在對於新手來說使用會造成一定困擾，小編根據大傢咨詢的最多的問題，特意整理一下，常規氨基柱的使用指南（基本上能夠滿足大部分品牌的操作），僅供大傢學習參考：第一個：我們要明確氨基柱的出廠保存溶劑，一般保存在正相溶劑中，但是由於反相條件使用較多，所以很多廠傢出廠也會保存在反相溶劑。初始為正相溶劑需要用其他模式時，要註意溶劑替換之間的過渡。下面是不同模式下的使用方法。

正相條件下使用：

1、使用前：先檢查流動相與色譜柱中的封存溶劑是否互溶，如互溶，可用流動相沖洗至少10 倍柱體積，將封存溶劑替換掉，待基線平穩後進樣；如不互溶，可用異丙醇低流速沖洗至少20 倍柱體積過渡，再使用流動相平衡後使用；

2、使用後：適當增大流動相中的強洗脫溶劑比例進行清洗，最後保存在異丙醇或正己烷中；

3、再生：依次用10倍柱體積的氯仿、異丙醇、二氯甲烷、流動相分別進行沖洗（如有壓力高的現象，可按此程序進行反沖色譜柱）；

4、脫水程序：用30mL含2.5% 2,2-二甲氧基丙烷和2.5% 冰醋酸的正己烷溶液沖洗色譜柱。

反相條件下使用：

1、使用前：如色譜柱正保存在正相溶劑中，使用反相方法，必須先用兩通連接系統和管路，用異丙醇沖洗，除去其中的乙腈、甲醇或水等。然後，再連接色譜柱，用至少20倍柱體積的異丙醇低流速沖洗過渡（一般對250*4.6mm色譜柱，0.5mL/min，需至少3小時；其它規格色譜柱請相應放大或縮小流速及時間），以除去正相保存溶液；再用至少10倍柱體積水/乙腈或甲醇(95:5)沖洗（不含緩沖鹽的流動相可省去），最後用流動相平衡好即可使用。如色譜柱正保存在反相溶劑中，更換流動相時請確保新流動相與柱子原保存溶液可互溶，並不會導致鹽析出。此步驟非常重要，如果沒有充分過渡，會對柱效及保留時間等產生影響；

2、使用後：先用95％水/有機相沖洗至少10倍柱體積，除去所用緩沖鹽（不含緩沖鹽的流動相可省去），再用95%有機相/水沖洗至少10倍柱體積並保存。短期不用的話，可保存在反相溶劑中；若長期不用，用異丙醇保存。

3、再生：如正常清洗無效果並伴有壓力升高的現象，可參照使用後清洗程序對色譜柱進行反沖；如果依然沒有效果，可再用異丙醇低流速反沖。

離子交換或HILIC條件下使用：

1、使用前和使用後：同反相條件下使用

2、再生：如正常清洗無效果並伴有壓力升高的現象，可參照使用後清洗程序對色譜柱進行反沖；如果依然沒有效果，用至少20倍柱體積的下列溶劑依次進行沖洗（該程序不能經常使用，否則反復接觸高pH溶液會造成矽膠溶解，從而導致峰形出現問題）：

①有機溶劑（乙腈或甲醇）/20mM碳酸氫銨(pH 10)=50/50，用來清洗離子鍵合成分

②水

③流動相

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