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糖苷酶專題(一)糖蛋白質組學研究工具簡介

實驗流程糖生物學是研究糖類的結構、功能及生物學特性的一門科學,糖類也可稱為多糖/聚糖,在自然界中廣泛分佈。在生物學中糖生物學雖然是一門較小的領域,但是發展迅速,與生物醫學、

實驗流程

糖生物學是研究糖類的結構、功能及生物學特性的一門科學,糖類也可稱為多糖/聚糖,在自然界中廣泛分佈。在生物學中糖生物學雖然是一門較小的領域,但是發展迅速,與生物醫學、生物技術和基礎研究都密切相關。蛋白質組學是對生物系統中蛋白質的系統研究,它拓展瞭我們對蛋白質表達、修飾、相互作用和功能的認知。但在真核細胞中,大多數蛋白質都經過瞭翻譯後修飾(1)。常見的翻譯後修飾(依賴於多糖)對細胞存活至關重要,見圖 1。糖基化決定瞭糖復合物的粘附特性,細胞與細胞和細胞

與病原體的接觸主要是通過糖與蛋白相互作用完成的,這體現瞭糖生物學重要性。糖組學是研究多糖在生物系統中表達的一門學科,通過有效的酶學和分析技術將多糖結構與功能關聯起來。

N-連接的糖基化存在於蛋白質的天冬酰胺殘基上,O-連接的糖基化存在於絲氨酸或蘇氨酸上


去糖基化酶

自然界存在多種聚糖,包括:N-連接糖、O-連接糖、糖脂、O-乙酰葡糖胺和糖胺聚糖。N 糖基化是多糖通過蛋白質上的天冬酰胺連接,O-糖基化是多糖通過蛋白質上的絲氨酸或蘇氨酸連接。去糖基化是將多糖從糖蛋白中去除的過程,這個過程通常是為瞭方便研究糖蛋白中的多肽部分或多糖部分。對多糖結構的詳細瞭解有助於與其功能關聯起來。隻有高靈敏的分析工具才能有助於這項研究。化學法和酶促法都可以從糖蛋白中去除寡糖。但化學方法,例如用弱堿(2)進行 β 消除或溫和的肼解(3)較為劇烈,會導致蛋白質降解。而酶促法則更為溫和,可以完全去除糖分而不會降解蛋白質。

NEB 為糖生物學研究提供一系列糖苷內切酶和糖苷外切酶,其中許多酶都是重組酶。所有產品均經過多項嚴格質控檢測,確保產品純度最高、批間差最小以及單位價格最低。所有糖苷酶產品均經過污染檢測,由於某些糖苷外切酶不能水解 p-硝基苯-糖苷,因此我們使用熒光標記的寡糖檢測有無糖苷酶污染。登陸 http://www.NEBglycosidase.com,獲取 NEB 酶和試劑的最新清單。


參考文獻

  1. Spiro, R.G. (2002) Glycobiology 12, 43R–56R.
  2. Kakehi, K. et al. (1994) J. Chromatogr. A. 680, 209–215.
  3. Royle, L. et al. (2002) Anal. Biochem. 304, 70–90.

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