CTL細胞是具有免疫殺傷效應的功能亞群，其分子表型為CD2+CD3+CD4–CD8+，約占總T淋巴細胞的5%～15%。CTL細胞的TCR通過識別MHCⅠ類分子限制性抗原，通過分泌穿孔素（perforin）、顆粒酶（granzyme A/B）和Fas/FasL等途徑直接、連續、特異性地殺傷靶細胞。對某些病毒、腫瘤細胞等抗原物質具有殺傷作用，與自然殺傷細胞構成機體抗病毒、抗腫瘤免疫的重要防線。實驗證實，CTL細胞如同CD4+T細胞一樣，也可根據它們所分泌的細胞因子譜分為Tc1和Tc2細胞亞群。這兩類Tc細胞具有許多類似於兩類Th細胞的生物學特征：Tc1能產生IL-2、TNF-β、IFN-γ等細胞因子，主要介導CTL細胞的細胞毒活性；而Tc2主要產生IL-4、IL-5和IL-10等，參與對B細胞的輔助。

Immunology，2011，132（4）：540-548.

IL-21誘導Tc22的分化

用anti-CD3和anti-CD28刺激CBMC，加入或者不加IL-21。流式細胞術檢測表明，IL-21誘導CBMC中CD4+T和CD8+T細胞IL-22的表達，但主要是誘導CD8+T細胞產生IL-22（A）。進一步從CBMC中純化出CD8+T細胞，用anti-CD3和anti-CD28刺激，加入或不加入IL-21（初次刺激）。用低濃度IL-2休息細胞後，再用PMA和Ionomycin刺激細胞（二次刺激）。流式細胞術結果分析表明，IL-21可以增加產生IL-22和IFN-γ的CD8+T細胞的頻率，但對IL-17的產生沒有影響（B）

調節性T細胞不同於Th1和Th2細胞，而是具有免疫抑制功能，參與多種免疫性疾病發生的病理過程，成為近年來免疫學領域研究的重要內容。調節性T細胞主要包括：自然調節T細胞、誘導性調節T細胞以及CD8+調節T細胞等。

在此我們以介紹自然調節T細胞（nTreg）為主，nTreg來自於胸腺細胞，表達轉錄因子Foxp3，其表型為CD4+CD25+Foxp3+，約占外周CD4+T細胞的5%～10%。nTreg細胞存在於周圍組織中，通過分泌TGF-β和IL-10等免疫抑制性細胞因子阻止潛在的自身免疫反應。因其具有免疫抑制作用，在多種免疫性疾病中起重要的調節作用，近來受到人們的廣泛關註。大量的研究表明，CD25分子（IL-2受體的a鏈）是nTreg細胞特有的表面標志。CD25分子在T細胞獲得雙重信號後組成性地表達，是T細胞活化的標志，因而效應性CD4+CD25–TE和調節性CD4+CD25–TR的區分一度成為難題。後來發現後者還有一個重要特點，即胞質中轉錄因子Foxp3為陽性，因而自然調節T細胞的表型特征應該是CD4+CD25–Foxp3+。現已查明，Foxp3不僅是自然調節T細胞的主要標志，而且還參與此類細胞的分化。另外，CD4+CD25+nTreg是唯一的一種除瞭表達CD25外，還表達CTLA-4和GITR（糖皮質激素誘導的TNF受體）的CD4+T細胞。CTLA-4與CD4+CD25+T細胞表面的B7分子結合後傳遞抑制信號，抑制T細胞的增殖和活化。

關於Treg的功能研究表明：一方面，現已證實nTreg是通過阻止自身反應性T細胞的激活而發揮它們的基本功能的；另一方面，最近很多研究結果都認為，nTreg在調節由病原體感染引起的免疫應答和阻止強烈的炎癥反應中起著關鍵性的作用。由於所有的T細胞都有MHC限制性並表現某種抗自身反應性，所以，我們推測：nTreg細胞同樣地有一個多樣性的TCR復合體，這一復合體能被自身抗原和病原體抗原所激活。

Tuberculosis（Edinb），2007，87（6）：526-534.

人外周血CD4+CD25+調節性T細胞的檢測

A.同型對照；B.正常人CD4+CD25+和CD4+CD25high細胞的表達。利用流式細胞術分析人外周血單個核細胞懸液中調節性T細胞的表達，將FSC-SSC散點圖內淋巴細胞群中的CD4+細胞設門，作為計算比例的“總體”顯示於圖中，圈出CD25陽性的細胞為CD4+CD25+這群新的細胞亞群，並圈出CD25高表達的細胞為CD4+CD25high細胞亞群

Tuberculosis（Edinb），2007，87（6）：526-534.

CD4+CD25-、CD4+CD25low和CD4+CD25high細胞CTLA-4和Foxp3的表達

細胞首先分別設門於CD4+CD25–，CD4+CD25low和CD4+CD25high細胞亞群（A），檢測三個亞群中CTLA-4和Foxp3的表達。可以看出，按照CD4+CD25–、CD4+ CD25low和CD4+CD25high細胞的順序，其CTLA-4和Foxp3的表達呈現逐漸升高的趨勢，尤其是在CD4+CD25high細胞亞群，其CTLA-4和Foxp3的表達在90%以上（B、C），與文獻報道調節性T細胞的表型特征一致

Tuberculosis（Edinb），2007，87（6）：526-534.

正常人外周血GITR的表達

GITR是調節性T細胞另外一個重要的表面標志，利用流式細胞術檢測正常人GITR的表達。細胞設門於CD3+CD4+T細胞，分析CD25和GITR的表達

Tuberculosis（Edinb），2007，87（6）：526-534.

CD4+CD25–、CD4+ CD25low和CD4+CD25high細胞表面記憶分子、歸巢分子和活化分子的表達

CD45RA和CD45RO是區分初始/記憶細胞的重要表面標志；CD62L是記憶細胞亞群的標志，與淋巴細胞歸巢特性相關。通過CD4和CD25將細胞分為CD4+CD25–、CD4+CD25low和CD4+CD25highT細胞，然後分別分析三個細胞亞群的記憶細胞表型特征。經過分析，與CD4+ CD25–和CD4+CD25low細胞相比，CD4+CD25high細胞表面CD45RA的表達下降，而CD45RO的表達明顯增高，即CD4+CD25high細胞為記憶性細胞的表型特征。此外，CD69是細胞表面早期活化標志，可以看出，CD4+CD25–、CD4+CD25low和CD4+CD25high細胞表面均無明顯CD69的表達。此外，CD27是與細胞分化程度相關的表面分子，然而，CD27在三個細胞亞群中表達均較高，無顯著差異。HLA-DR是另外一種T細胞表達的晚期活化標志，可以看到，HLA-DR的表達在CD4+ CD25–、CD4+CD25low和　CD4+ CD25high細胞亞群呈現增加的趨勢。